Esprit curieux et aimant les passerelles entre les arts, Florence Marguier est formée au théâtre par Pierre Casari et Daniel-Claude Poyet, fondateur du nouveau théâtre des Marronniers de Lyon. Elle joue pour la première fois dans un conte japonais écrit par Etienne Catalan et mis en scène par l'auteur aux Nuits de l'Enclave de Valréas. C'est en venant à Paris qu'elle réalise le premier film-documentaire sur l'écrivain Charles Juliet. Puis, après avoir cherché sa voie à travers différentes approches théâtrales, elle entre comme comédienne et dramaturge au théâtre Populaire de Sarcelles pendant dix ans. Là, elle crée, sous la direction de Jacques Salomé, des rôles du répertoire parmi lesquels Clytemnestre dans l'Orestie, Sonia dans Oncle Vania de Tchekhov, La Baronne de Turcaret de Lessage, Matamore dans L'Illusion comique de Corneille, etc. Parallèlement, elle crée sa compagnie qui s'ouvre sur des formations d'acteurs et monte des spectacles pluridisciplinaires. En 2000, elle crée dans La lumière des Saisons de Charles Juliet à la Maison de la Poésie de Paris ; participe à l'ouverture des Ateliers d'Amphoux d'Avignon, dirigés par Monique Cerf où elle revient chaque saison ; rédige des essais sur des créateurs; travaille à France-Culture ; fonde les Journées des Voyages Intérieurs.